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针对填料保留机理的不同,固相萃取操作步骤的不同模式
点击次数:711 更新时间:2021-07-21
固相萃取主要是通过固相吸附剂上的官能团与目标化合物的官能团之间的作用力来保留/吸附的,这种作用力可分为非极性作用力、极性作用力、离子作用力、共价作用力等。

固相萃取操作步骤
针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质),操作稍有不同

目标化合物保留模式
操作一般有四步:
①活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。
②上样----将样品用一定的溶剂溶解,转移入柱并使组分保留在柱上。
③淋洗----大程度除去干扰物。
④洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。(注意流速不要过快)

杂质保留模式
操作一般有三步:
①活化----除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。
②上样----将样品转移入柱,此时大部分目标化合物会随样品基液流出,杂质被保留在柱上,故此步骤要开始收集
③洗脱----用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集,合并收集液。(注意流速不要过快)

固相萃取使用特点
1、样品溶液体系性质要与固相萃取要求相适应。例如:在C18吸附待测化合物的模式中,样品溶液体系中有机溶剂的比例不能太高;在C18吸附样品基质的模式中,样品溶液体系中有机溶剂的比例不能太低。
2、要注意填料承载能力,防止上样超载导致检测结果不准确。
3、过柱流速要合适,不能过快或过慢,特别是样品溶液上柱和洗脱两个环节的过柱速度要控制。一般过柱流速为1~3mL/min。
4、对于使用硅胶基质的SPE小柱在样品溶液上柱前不能干涸。如果干涸了应该重新对小柱进行活化。

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